三年連考生物知識點：微生物的分離和培養

　　2020年高考即將開戰，你準備好了嗎？對于高中生物成績不好的同學來說，熟悉復習資料的積累要隨時整理。高考網小編為各位考生整理了一些高考生物必備的知識點，供大家參考閱讀！

　　一、目的要求

　　1、掌握各種分離、接種方法。

　　2、掌握無菌操作基本環節。

　　二、實驗說明

　　微生物在自然界中呈混雜狀態存在，要獲得所需菌種，必需從中把它們分離出來。在保存菌種時不慎受到到污染也需予以分純。微生物分離和純化的方法很多，但基本原理卻是相似的，即將待分離的樣品進行一定的稀釋，并使微生物的細胞（或孢子）盡量以分散狀態存在，然后使其長成一個個純種單菌落。然而上述工作又離不開接種，即將一種微生物移到另一滅過菌的培養基上的過程。

　　三、實驗材料

　　1、恒溫培養箱。

　　2、接種環、玻璃棒、吸管、酒精燈。

　　3、培養基（上次實驗配制的）。

　　4、大腸桿菌、枯草桿菌、金黃色葡萄球菌、酵母菌。

　　四、方法步驟

　　（一）接種的操作

　　1、斜面接種（接金黃葡萄球菌）

　　（1）操作前，先用75%酒精擦手，待酒精揮發后點燃酒精燈。

　　（2）將菌種管和斜面握在左手大姆指和其它四指之間，使斜面和有菌種的一面向上，并處于水平位置。

　　（3）先將菌種和斜面的棉塞旋轉一下，以便接種時便于拔出。

　　（4）左手拿接種環（如握鋼筆一樣），以火焰上先將環端燒紅滅菌，然后將有可能伸入試管其余部位也過火滅菌。

　　（5）用右手的無名指、小指和手掌將菌種管和待接斜面試管的棉花塞或試管帽同時拔出，然后讓試管口緩緩過火滅菌（切勿燒過燙）。

　　（6）將灼燒過的接種環伸入菌種管內，接種環在試管內壁或未長菌苔的培養基上接觸一下，讓其充分冷卻，然后輕輕刮取少許菌苔，再從菌種管內抽出接種環。

　　（7）迅速將沾有菌種的接種環伸入另一支待接斜面試管。從斜面底部向上作“Z”形來回密集劃線。有時也可用接種針僅在培養基的中央拉一條線來作斜面接種，以便觀察菌種的生長特點。。

　　（7）迅速將沾有菌種的接種環伸入另一支待接斜面試管。從斜面底部向上作“Z”形來回密集劃線。有時也可用接種針僅在培養基的中央拉一條線來作斜面接種，以便觀察菌種的生長特點。

　　（8）接種完畢后抽出接種環灼燒管口，塞上棉塞。

　　（9）將接種環燒紅滅菌。放下接種環，再將棉花塞旋緊。

　　2、液體接種

　　（1）由斜面培養基接入液體培養基，此法用于觀察細菌的生長特性和生化反應的測定，操作方法與前相同，但使試管口向上斜，以免培養液流出接入菌體后，使接種環和管內壁磨擦幾下以利洗下環上菌體。接種后塞好棉塞將試管在手掌中輕輕敲打，使菌體充分分散。

　　（2）由液體培養基接種液體培養基，菌種是液體時，接處除用接種環外尚用無菌吸管或滴管。接種時只需在火焰旁拔出棉塞,將管口通過火焰,用無菌吸管吸取菌液注入培養液內,搖勻即可。

　　3、平板接種

　　將菌在平板上劃線和涂布。

　　（1）劃線接種 見分離劃線法。

　　（2）涂布接種 用無菌吸管吸取菌液注入平板后，用滅菌的玻棒在平板表面作均勻涂布。

　　4、穿刺接種

　　把菌種接種到固體深層培養基中，此法用于嫌氣性細菌接種或為鑒定細菌時觀察生理性能用。

　　（1）操作方法與上述相同，但所用的接種針應挺直。

　　（2）將接種針自培養基中心刺入，直刺到接近管底，但勿穿透，然后尚原穿刺途徑慢慢拔出。