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        高考生物復(fù)習(xí):胡蘿卜的組織培養(yǎng)

        來源:網(wǎng)絡(luò)資源 2019-05-14 16:24:22

          一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>

          胡蘿卜是細(xì)胞和組織培養(yǎng)中常用的經(jīng)典材料,是教學(xué)實(shí)驗(yàn)的良好材料。通過本實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn),要求學(xué)生熟悉胡蘿卜離體根培養(yǎng)的基本方法和步驟,掌握愈傷組織誘導(dǎo)的基本技能。

          二、實(shí)驗(yàn)原理:

          植物體的莖,根,葉細(xì)胞一般都具有全能性,在一定條件的營養(yǎng)和激素等條件下,

          可以脫分化形成愈傷組織。將愈傷組織轉(zhuǎn) 接到含有不同激素成分的培養(yǎng)基上,就可以誘導(dǎo)其再分化生成胚狀體或叢芽,進(jìn)而發(fā)育成完整的小植株。植物組織培養(yǎng)的全過程,證明了分化的植物細(xì)胞,仍具有形成完整植株所需要的全部基因。

          三、實(shí)驗(yàn)用具:超凈臺 解剖刀 刮皮刀 不銹鋼打孔器 培養(yǎng)皿 溫箱

          四、方法步驟:

          1. 將胡蘿卜用自來水沖洗干凈,用刮皮刀除去表皮1-2mm,橫切成大約10mm厚的切片。以下步驟均在無菌條件下進(jìn)行。

          2. 胡蘿卜片經(jīng)70%乙醇處理30秒鐘后,用無菌水沖洗一遍,再用、2%的次氯酸鈉溶液浸泡10分鐘,無菌水沖洗3~4次。

          3. 將胡蘿卜片放入培養(yǎng)皿中,一手用鑷子固定胡蘿卜片,一手用打孔器垂直打孔,每個小孔打在靠近維管形成層的區(qū)域,務(wù)必打穿組織。然后從組織片中抽出打孔器,將胡蘿卜組織片收集在裝有無菌水的培養(yǎng)皿。重復(fù)打孔步驟,直至收集到足夠數(shù)量的組織圓片。

          4. 用鑷子取出組織圓片,放入培養(yǎng)皿中,用刀片將組織圓片切成2mm長的小塊,放入裝有無菌水的培養(yǎng)皿中。在整個操作過程中鑷子和解剖刀要多次火焰消毒,冷卻后再使用。

          5、將胡蘿卜組織小塊放到滅過菌的濾紙上,吸干水分后接種到培養(yǎng)基表面。注意接種時培養(yǎng)瓶要有一定傾斜度,接種過程中鑷子不要直接在培養(yǎng)基上方完成,以減少污染機(jī)會。

          6、將培養(yǎng)物一部分置于25。C溫箱中暗培養(yǎng),另一部分到光照培養(yǎng)室中進(jìn)行培養(yǎng),以比較光照和暗培養(yǎng)對愈傷組織誘導(dǎo)的反應(yīng)。

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