高三生物如何掌握這些重要實驗？
2019-01-11 21:39:10三好網
實驗一：觀察DNA和RNA在細胞中的分布
1.實驗原理：利用甲基綠和吡羅紅混合染色劑將細胞染色，可以顯示DNA和RNA在細胞中的分布；甲基綠和吡羅紅對DNA和RNA的親和力不同：甲基綠+DNA→綠色
吡羅紅+RNA→紅色
2.分布：真核生物DNA主要分布在細胞核中；
線粒體和葉綠體內也含有少量的DNA；RNA主要分布在細胞質中。
3.實驗結果：細胞核呈綠色，細胞質呈紅色.
4.實驗結論：DNA主要分布在細胞核中；RNA主要分布在細胞質中；
5.實驗流程：
(1)取口腔上皮細胞制片：①載玻片上滴一滴質量分數為：0.9%NaCl溶液；
②漱口后，用消毒牙簽刮口腔內壁后放在載玻片的液滴中涂抹幾下；③載玻片在酒精燈上烘干，蓋上；
(2)水解：①載玻片放入盛有30ml質量分數為8%的HCl的小燒杯中；②大燒杯中加入30℃溫水；
③將小燒杯放入大燒杯中保溫5min；
(3)沖洗涂片：用蒸餾水的緩水流沖洗載玻片10s；
(4)染色：①吸水紙吸去載玻片的水分；②滴兩滴混合染液，染色5min；③吸去多余的染液，蓋上蓋玻片；
(5)觀察：先低倍后高倍；
6、幾種液體在實驗中的作用：
(1)0.9%NaCl溶液：保持口腔上皮的正常形態。
8%的HCl：①改變細胞膜等的通透性；②使染色質中的DNA與蛋白質分開。蒸餾水：配置染液；沖洗載玻片。
(2)混合染液需要現配現用；
(3)該實驗不宜用深色的材料，避免顏色對實驗的干擾。
實驗二：物質鑒定
一、實驗原理：還原糖+斐林試劑～磚紅色沉淀(水浴加熱)
脂肪+蘇丹III～橘黃色(滴液觀察或制片顯微鏡觀察)
脂肪+蘇丹IV～紅色
蛋白質+雙縮脲試劑～紫色反應(不加熱)
1、還原糖的檢測
(1)材料的選取：還原糖含量高，白色或近于白色，如：蘋果，梨，白蘿卜。
(2)試劑：斐林試劑(甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液)，現配現用。
(3)步驟：取樣液2mL于試管中→加入剛配的斐林試劑1mL(斐林試劑甲液和乙液等量混合均勻后再加入)→水浴
加熱2min左右→觀察顏色變化(白色→淺藍色→磚紅色)
實驗三：觀察葉綠體和細胞質流動
1、材料：新鮮蘚類葉、黑藻葉或菠菜葉，口腔上皮細胞臨時裝片
2、原理：葉綠體在顯微鏡下觀察，綠色，球形或橢球形。
用健那綠染液染色后的口腔上皮細胞中線粒體成藍綠色，細胞質接近無色。
知識概要：取材、制片、低倍觀察、高倍觀察
實驗四：觀察有絲分裂
1、材料：洋蔥根尖(蔥，蒜)
2、步驟：(一)洋蔥根尖的培養
(二)裝片的制作
3、實驗原理：
(1)龍膽紫溶液能將染色體染成深色
(2)有絲分裂各個時期細胞內染色體的形態和行為變化不同，可用高倍顯微鏡根據各個時期內染色體的變化情況，識別該細胞處于那個時期。
制作流程：解離→漂洗→染色→制片
1.解離：藥液：質量分數為15%的鹽酸，體積分數為95%的酒精(1：1混合液).時間：3~5min.目的：使組織中的細胞相互分離開來.
2.漂洗：用清水漂洗約10min.目的：洗去藥液，防止解離過度，并有利于染色.
3.染色：用質量濃度為0.01g/mL或0.02g/mL的龍膽紫溶液(或醋酸洋紅液)染色3~5min
目的：使染色體著色，利于觀察.
4.制片：將根尖放在載玻片上，加一滴清水，并用鑷子把根尖弄碎，蓋上蓋玻片，在蓋玻片上再加一片載玻片.然后用拇指輕輕地按壓載玻片.
目的：使細胞分散開來，有利于觀察.
(三)觀察
1、先在低倍鏡下找到根尖分生區細胞：細胞呈正方形，排列緊密，有的細胞正在分裂。(長方形：伸長區)
2、換高倍鏡下觀察：分裂中期→分裂前、后、末期→分裂間期。(注意各時期細胞內染色體形態和分布的特點)。其中，處于分裂間期的細胞數目最多。
實驗五：色素的提取和分離
1、原理：(1)葉綠體中的色素能溶解在有機溶劑丙酮或無水乙醇——提取色素(2)各色素在層析液中的溶解度不同，隨層析液在濾紙上擴散速度不同——分離色素
2、步驟：
提取色素
(1)稱取5g綠色葉片并剪碎提取色素
(2)加入少量SiO2、CaCO3和5ml丙酮
(研缽→研磨→漏斗過濾→，收集到試管內并塞緊管口)
制濾紙條
(1)將干燥的濾紙剪成6cm長，1cm寬的紙條，剪去一端兩角(使層析液同時到達濾液細線)
(2)在距剪角一端1cm處用鉛筆畫線
濾液劃線
(1)用毛細管吸少量的濾液沿鉛筆線處小心均勻地劃一條濾液細線
(2)干燥后重復劃2-3次
紙上層析
(1)向燒杯中倒入3ml層析液(以層析液不沒及濾液細線為準)
(2)將濾紙條尖端朝下略微斜靠燒杯內壁，輕輕插入層析液中
(3)用培養皿蓋蓋上燒杯
觀察結果：濾紙條上出現四條寬度、顏色不同的彩帶。
